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液氮容器的用处有哪些[2019-05-13]
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-80℃及液氮冻存外周血干细胞的基础及临床研究

发布:xxsplt 发布时间:2019-05-05 12:22:11 浏览:86次

    

    -80℃及液氮冻存外周血干细胞的基础及临床研究气相液氮罐


    摘要目的:探讨非程控降温-80℃冰箱冻存自体外周血干细胞(APRSC)与程控降温液lu冻存APBSC对细胞生物学的影响,井对自体造血干细胞移植的效果进行比较,为非程控降温-80℃冰箱冻存APBSC在临床上的推广应用提供依据。方法:回顾性分析非程控降温-80℃冰箱冻存APBSC及群控降温液氮冻存APBSC对ANC、MNC、CD34+细胞以及CFU-GM回收率的影响,并对72例接受自体造血干细胞移植的血液系统恶性肿瘤病人的造血重建的速度进行了比较。结果:两种冻存方法的ANC、MNC、CD34+细胞及CFU。GM回收率的影响无显著差异,移植后造血重建的速度亦无显著差异。结论:非程控降温-80℃冰箱冻存APBSC是一种简便易行的冻存方法。在国内某些单位可以替代程控降温液氰冻存APRSC进行干细胞移植。

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    关键词自体造血干细胞移植造血干细胞(冻存)恶性肿瘤


    非程控降温-80℃冰箱冻存自体外周血千细胞(APBSC)因其简便易行。在国内上E在不断地推广,我科自1988年开展程控降温液氨冻存APBSC进行干细胞移植及非程控降温-80℃冰箱冻存自体外周血干细胞移植以来,共完成了72例。现将两种冻存自体外周血干细胞移植结果总结如下。但禹内尚缺乏对二者的系统比较研究。我们试图通过系统比较二者的区别。观察非程控降温-80℃冰箱冻存APBSC进行干细胞移植的有效性和可行性。


    病例和方法


    1.1病例液氮凉存组36例,男性19例,女性L7例。平均年龄26。2(4—47)岁。急性髓细胞白血病(AWL)儿例,急性淋巴细胞白血病(ALL)12例。非霍奇金淋巴瘤(NHL)6例,骨髓增生异常综合征(iWI)S)RAEBT3例,霍奇金淋巴瘤(1-11))l倒,粒淋混合急性白血病2例,多发性骨髓瘤(删)l例。-80℃冰箱冻存组36例,男23例。女13例,平均年龄25。4(5—50)岁。急性髓细胞白血稍(A虬)7倒,急性淋巴细胞白血稿(从L)13例。非霍奇金淋巴瘤(NltL)11例。骨髓增生异常综台征(MDS)RAEBTl例。霍奇金淋巴瘤(1iD)2例。粒淋混合急性自血病l例。乳腺癌l例,神经母细胞瘤l例。


    1.2APBSC动员[21全部病例均采用化疗+刺激因子进行动员。方法为强化化疗后9。10大+WBC确已F降至zui低值(一般在2。0X10’,L以F),并开始有回升的趋势,同时PLT不低于20X109几时,使用造血刺激园子,利罱为150p∥12b。皮F注射。至采集结求。动员天数,液氮冻存组,平均5犬(4—7犬):一80℃冰箱冻存组,平均4。5天(3-6天)。


    1.3APBSC采集当w13c恢复至4.0—10。0X109/L时开始采集,液氮冻存组均用Bxter公司的CS一3000型血细胞分离机进行分离采集;-80℃冰箱冻存组均用COBE公司的Spectra型血细胞分离机进行分离采集。通过股静脉插管(12F般腔Arrow公司)或通过救臂外周静脉建立外周通道。每次循环血量中位数为8000ml(5000—13000m1)。采集时分血流速平均50m1/分。两组采集的有核细胞数(Nc)、单个核细胞数(M№)、CD。CFU。GM的数量见表。。台盼蓝拒染率均为100%。


    I.4APBSC冻存两组采集的APBSC悬液,平均每次约60m1。加少许肝素。计算单个核细胞(眦)数,加入R蹦r1640保养液,按l:1比例与冷冻保护液均匀混合。-80℃冰箱冻存组使保护液终浓度为5%二甲基强砜(删S0),6%羟乙基淀粉(HES),螂白蛋白(ALB),llNC含量为2—5x108/ml。将所得混合液装于冷冻袋中。直接置于-80X]冰箱中冻存。液lu组保护液终浓度为5%1圳S0,经卜3℃/分程控降温至-80℃后置-196℃液氮中保存。冻存大数,液氮冻存组,中付数22.5(13—50)天。-80℃冰箱冻存组,中位数23(15-44)天。


    1.5预处理方案两组病人的预处理方案相似,即AML、ALL、MDS及NHL均用CAT或CET.C:CTX60mg/kg/d×2天,A:Ara—c卜39/d×l天.E:vPl6300-1000mg/d×l天,中位剂量600mg/d.TBI总量zui低6Gy,zui高8.5(毗分两天,剂量率<5.0rad/min。预处理结束后24小时回输APBSC。


    l.6APBSC的解冻:将冻存袋自-80℃冰箱中或液氮中取出后立即放入40℃水浴箱中讯速解冻,不过滤,经中心静脉插管讯速回输。


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